Plásmido Doble Nickase (h) Histone cluster 1 H2BK: sc-417678-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Histone cluster 1 H2BK consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Histone cluster 1 H2BK (h) y el plásmido de doble nickasa Histone cluster 1 H2BK (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HIST1H2BK. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Histone cluster 1 H2BK | sc-417678-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Histone cluster 1 H2BK | sc-417678-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HIST1H2BK codifica una histona H2B de la familia dependiente de la replicación que se integra en los nucleosomas para compactar el ADN genómico y regular la accesibilidad de la cromatina. A través de su papel en el ensamblaje de nucleosomas, el intercambio de histonas y la organización de la cromatina de orden superior, la histona del clúster 1 H2BK influye en el control de la transcripción, el momento de la replicación del ADN y la señalización y reparación del daño en el ADN. Las modificaciones postraduccionales en H2B, incluidas la ubiquitinación y la fosforilación, participan en la comunicación cruzada con otras marcas de histonas que coordinan la progresión del ciclo celular y la estabilidad del genoma. La desregulación de la dosis de genes de histonas o los estados alterados de la cromatina se asocian ampliamente con programas transcripcionales oncogénicos y una reparación aberrante del ADN, lo que hace de HIST1H2BK un locus útil para estudiar mecanismos epigenéticos relevantes para la remodelación de la cromatina asociada a enfermedades.
Histone cluster 1 H2BK El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HIST1H2BK en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HIST1H2BK. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HIST1H2BK. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HIST1H2BK alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.