Plásmido Doble Nickase (h) Histamine H2 Receptor: sc-401935-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Histamine H2 Receptor consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Histamine H2 Receptor (h) y el plásmido de doble nickasa Histamine H2 Receptor (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HRH2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
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| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Histamine H2 Receptor | sc-401935-NIC | 20 µg | $410.00 |
HRH2 codifica el receptor H2 de la histamina, un receptor acoplado a proteína G que se acopla principalmente a Gs para estimular la adenilil ciclasa, elevar el AMPc y activar la señalización dependiente de PKA. En contextos epiteliales e inmunitarios, la señalización de HRH2 modula la secreción, la fisiología de la barrera y el tono inflamatorio, integrándose con redes de segundos mensajeros que influyen en la expresión génica y el metabolismo celular. Como parte de la comunicación mediada por histamina en tejidos gastrointestinales y respiratorios, HRH2 se estudia con frecuencia en relación con la homeostasis mucosa y los microambientes inflamatorios desregulados. Las alteraciones en la dinámica de señalización del receptor también son relevantes para investigaciones sobre el diálogo cruzado neuroinmunitario y vías de señalización asociadas a tumores, donde programas dependientes de AMPc pueden remodelar el comportamiento celular.
Histamine H2 Receptor El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HRH2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HRH2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HRH2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HRH2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.