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HES4慢病毒激活颗粒(h) | sc-408938-LAC | 200 µl | $455.00 |
HES4(hairy and enhancer of split 4)是一种基础螺旋-环-螺旋(bHLH)型转录抑制因子,位于 Notch 信号通路下游,通过调控细胞命运决定、谱系承诺以及分化时序来发挥作用。HES4 可结合类似 E-box 的基序并招募共抑制复合物,从而限制与祖细胞维持和发育模式建立相关的转录程序。HES 家族活性的改变常在 Notch 调控转录影响细胞增殖、分化和组织稳态的情境中被研究,包括肿瘤生物学与神经发育过程。在人类系统中,HES4 是一个便于操作的关键节点,可用于探究 Notch 通路输出与染色质调控基因表达交汇处的转录调控网络。
HES4 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 HES4 表达。
HES4 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在HES4转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性HES4表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 HES4 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。