HES3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406281

Visão geral

HES3 (hairy and enhancer of split 3) é um represssor transcricional do tipo hélice–alça–hélice (bHLH) que atua a jusante da sinalização Notch para modular programas de expressão gênica que controlam decisões de destino celular. Ele contribui para a manutenção de estados indiferenciados e para a regulação do comprometimento de linhagem ao antagonizar fatores de transcrição proneurais e associados à diferenciação, integrando sinais de vias do desenvolvimento. Em células humanas, alterações na atividade da família HES têm sido associadas à diferenciação desregulada, à proliferação aberrante e a fenótipos semelhantes aos de células-tronco em contextos relevantes para doenças, tornando o HES3 um ponto útil para estudar o controle transcricional de programas de desenvolvimento. Seus papéis em redes gênicas ligadas ao neurodesenvolvimento e a progenitores sustentam investigações sobre o acoplamento entre sinalização e transcrição e sobre a regulação epigenética.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HES3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HES3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HES3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HES3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HES3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HES3 para a investigação da sinalização de HES3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HES3 críticos para a função HES3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HES3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HES3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HES3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HES3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HES3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HES3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HES3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HES3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.