HCR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407960
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HCR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HCR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HCR Anticorpo (E-4): sc-365889
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HCR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407960 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CCHCR1 codifica a proteína humana coiled-coil α-helicoidal em haste (HCR), uma proteína citoplasmática e perinuclear implicada na regulação da diferenciação de queratinócitos, na homeostase da barreira epidérmica e na organização do citoesqueleto. A HCR tem sido associada a processos que influenciam o tráfego vesicular e a proliferação celular, em consonância com o seu enriquecimento na biologia da pele e do folículo piloso. Variações genéticas e alterações na expressão de CCHCR1 estão associadas à suscetibilidade à psoríase e a fenótipos inflamatórios cutâneos relacionados, o que sustenta a sua relevância para vias que ligam respostas epiteliais ao stress e a sinalização imunitária. Como resultado, CCHCR1 é frequentemente estudado em modelos de biologia de queratinócitos, de crosstalk da sinalização inflamatória e de genética de doenças da pele.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HCR (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CCHCR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CCHCR1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CCHCR1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HCR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CCHCR1 para a investigação da sinalização de HCR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CCHCR1 críticos para a função HCR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CCHCR1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HCR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HCR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CCHCR1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HCR Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HCR (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CCHCR1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CCHCR1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.