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GATA-6双切口酶质粒(h) | sc-400724-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GATA-6双切口酶质粒(h2) | sc-400724-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GATA6 编码锌指转录因子 GATA-6。GATA-6 是决定谱系的关键调控因子,参与内胚层与中胚层分化,控制与器官发生、上皮细胞身份以及平滑肌相关程序有关的基因网络。在人类细胞中,GATA-6 整合发育信号输入,调节控制增殖、迁移和细胞命运承诺的转录回路,其中包括与 Wnt、BMP 以及 Notch 依赖的模式化相关的通路。GATA6 表达失调或拷贝数改变与先天性发育缺陷有关,并且在胃肠道、胰腺和肺等谱系中,可在不同情境下与致癌或抑癌的转录状态相关联。这些特性使 GATA-6 成为一个有用的关键节点,可用于在疾病相关模型中解析分化、谱系可塑性以及应激适应性重塑的转录调控机制。
GATA-6 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GATA6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GATA6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GATA6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GATA6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。