galectin-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421419
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- galectin-7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico galectin-7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:galectin-7 Anticorpo (A-8): sc-271473
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
galectin-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421419 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Lgals7 de camundongo codifica a galectina-7, uma lectina ligante de β-galactosídeos enriquecida em epitélios estratificados, que regula interações célula–célula e célula–matriz por meio do reconhecimento de glicanos. A galectina-7 tem sido associada ao controle da proliferação e diferenciação de queratinócitos, à homeostase da barreira epitelial e a respostas ao estresse, com papéis descritos na modulação da apoptose e da sinalização inflamatória. Por seus efeitos sobre a adesão e programas de reparo de feridas, Lgals7 é relevante para estudos de biologia da pele, remodelamento epitelial e fenótipos associados a tumores, como migração e invasão. A expressão desregulada de galectina-7 tem sido associada a doenças inflamatórias da pele e a cânceres epiteliais, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas focadas em vias e biomarcadores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO galectin-7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Lgals7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Lgals7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Lgals7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína galectin-7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Lgals7 para a investigação da sinalização de galectin-7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Lgals7 críticos para a função galectin-7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Lgals7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo galectin-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo galectin-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Lgals7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo galectin-7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR galectin-7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Lgals7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Lgals7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.