fractalkine Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422853-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- fractalkineO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase fractalkine (m) e o Plasmídeo Double Nickase fractalkine (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cx3cl1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
fractalkine Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422853-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
fractalkine Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-422853-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino Cx3cl1 codifica a fractalquina (CX3CL1), uma quimiocina CX3C única, apresentada tanto como uma molécula de adesão ancorada à membrana quanto como um quimioatraente solúvel após clivagem proteolítica (shedding). Ao se ligar ao CX3CR1, a fractalquina regula a adesão, a quimiotaxia e a sobrevivência de leucócitos, integrando a sinalização inflamatória com interações célula–célula nos compartimentos vascular, neural e imunológico. Esse eixo modula a comunicação micróglia–neurônio, o tráfego de monócitos e a ativação endotelial, influenciando processos como remodelamento sináptico, vigilância tecidual e recrutamento impulsionado por citocinas. A desregulação da sinalização CX3CL1/CX3CR1 tem sido implicada em neuroinflamação, aterosclerose e estados inflamatórios crônicos, tornando Cx3cl1 um alvo útil para dissecar a comunicação cruzada entre sistema imune e tecidos.
fractalkine O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cx3cl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cx3cl1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cx3cl1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cx3cl1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.