FLRT3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406632
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FLRT3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FLRT3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FLRT3 Anticorpo (A-3): sc-514482
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FLRT3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406632 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FLRT3 (proteína transmembranar 3 rica em leucina e fibronectina) codifica uma proteína de membrana de passagem única que atua como um sinal de adesão celular e de orientação durante o desenvolvimento, coordenando interações célula–célula e o crescimento de neuritos. FLRT3 participa de redes de sinalização que envolvem vias do receptor de FGF e ligantes extracelulares de orientação, como os receptores UNC5, influenciando adesão, repulsão e o padrão de organização dos tecidos. Por meio dessas interações, FLRT3 contribui para a regulação da migração celular, da formação de sinapses e da morfogênese em múltiplos contextos teciduais. Alterações na expressão de FLRT3 e na conectividade de suas vias foram relatadas em estudos de processos do neurodesenvolvimento e da biologia do câncer, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas de adesão e migração.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FLRT3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FLRT3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FLRT3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FLRT3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FLRT3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FLRT3 para a investigação da sinalização de FLRT3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FLRT3 críticos para a função FLRT3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FLRT3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FLRT3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FLRT3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FLRT3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FLRT3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FLRT3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FLRT3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FLRT3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.