Filamin 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402358
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Filamin 2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Filamin 2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Filamin 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402358 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FLNC codifica a filamina 2, uma grande proteína de suporte (scaffold) ligante de actina que entrecruza a F-actina e conecta o citoesqueleto a recetores de membrana e a complexos de sinalização. A filamina 2 coordena a mecanotransdução, a forma celular e a dinâmica de adesão ao organizar redes de actina e interagir com integrinas e a maquinaria associada às adesões focais. No músculo estriado, o FLNC sustenta a integridade sarcomérica e miofibrilar e contribui para a transmissão de força e para respostas ao stress. Alterações genéticas em FLNC estão associadas a cardiomiopatias e miopatias miofibrilares, tornando-o um alvo relevante para estudar a remodelação do citoesqueleto e os mecanismos de doença muscular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Filamin 2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FLNC em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FLNC, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FLNC na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Filamin 2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FLNC para a investigação da sinalização de Filamin 2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FLNC críticos para a função Filamin 2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FLNC para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Filamin 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Filamin 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FLNC. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Filamin 2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Filamin 2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FLNC para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FLNC definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.