Plásmido Doble Nickase (h) FGF-7: sc-401243-NIC

FGF7 codifica el factor de crecimiento de fibroblastos 7 (FGF-7, factor de crecimiento de queratinocitos), un ligando paracrino que señaliza principalmente a través de FGFR2b para regular la proliferación, supervivencia, migración y diferenciación de las células epiteliales. La actividad de FGF-7 activa vías canónicas de receptores tirosina cinasa, incluidas RAS–MAPK/ERK, PI3K–AKT y PLCγ/PKC, modulando programas de reparación tisular y la comunicación epitelio–mesénquima. La desregulación de la señalización FGF7–FGFR2b se ha implicado en el remodelado epitelial anómalo y en microambientes inflamatorios, y se estudia con frecuencia en el contexto del control oncogénico del crecimiento epitelial y del diálogo entre estroma y tumor. In vitro, la perturbación de FGF7 se utiliza para investigar la función de barrera, las respuestas de cicatrización y la dependencia de factores de crecimiento en distintos linajes epiteliales.

FGF-7 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FGF7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FGF7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FGF7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FGF7 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.