Estrogen Receptor beta Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400213-LAC

O ESR2 humano codifica o receptor de estrogênio beta (ERβ), um receptor nuclear ativado por ligante que atua como fator de transcrição, regulando redes gênicas envolvidas em diferenciação celular, proliferação, apoptose, inflamação e homeostase metabólica. Após a ligação a estrogênios ou ligantes seletivos, o ERβ aciona a sinalização canônica de receptores nucleares via elementos de resposta ao estrogênio e realiza crosstalk com as vias MAPK/ERK, PI3K/AKT, NF-κB e TGF-β, moldando programas transcricionais específicos do contexto. A expressão de ESR2 e a atividade do ERβ têm sido implicadas na biologia responsiva a hormônios em tecidos reprodutivos, cardiovasculares, imunes e do sistema nervoso central, e são frequentemente estudadas por seus papéis na biologia tumoral, na regulação endócrina e em mecanismos de doenças inflamatórias. A desregulação da sinalização de ESR2 pode alterar a transcrição dependente do estado da cromatina, tornando-o um alvo relevante para investigar isoformas do receptor, uso de co-reguladores e reconfiguração de vias em modelos celulares associados a doenças.

As Partículas de Ativação Lentivirais Estrogen Receptor beta (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de ESR2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Estrogen Receptor beta (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição ESR2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Estrogen Receptor beta. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo ESR2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.