Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
ErbB4/HER4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420220
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ErbB4/HER4 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ErbB4/HER4, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ErbB4/HER4 Anticuerpo (C-7): sc-8050
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ErbB4/HER4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420220 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Erbb4 codifica el receptor tirosina quinasa ErbB4/HER4, un miembro de la familia EGFR/ErbB que se une a neuregulinas y a otros ligandos tipo EGF para regular la señalización célula‑célula. Tras la dimerización inducida por el ligando, ErbB4 activa cascadas aguas abajo que incluyen PI3K–AKT, RAS–RAF–MEK–ERK, JAK–STAT y PLCγ/PKC, configurando programas de proliferación, supervivencia, diferenciación y migración. En tejidos de ratón, ErbB4 es especialmente importante en el neurodesarrollo y la señalización sináptica, así como en la biología epitelial y cardíaca, donde contribuye al patrón y la homeostasis impulsados por factores de crecimiento. La desregulación de la señalización de ErbB4 y las alteraciones en la comunicación cruzada entre vías se han implicado en redes de señalización relacionadas con el cáncer y en fenotipos neurológicos, lo que respalda su uso como nodo mecanístico para estudios de vías y de relaciones genotipo‑fenotipo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ErbB4/HER4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Erbb4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Erbb4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Erbb4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ErbB4/HER4.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Erbb4 para la investigación de la señalización de ErbB4/HER4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Erbb4 críticos para la función de ErbB4/HER4
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Erbb4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ErbB4/HER4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ErbB4/HER4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Erbb4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ErbB4/HER4 (m) y el plásmido HDR ErbB4/HER4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Erbb4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Erbb4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.