EGR1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (r): sc-437290-LAC

EGR1 (early growth response 1) é um fator de transcrição de resposta imediata, rapidamente induzido por sinais mitogênicos e de estresse, atuando como um regulador central de programas de expressão gênica dependentes de estímulo em células de rato. Ele integra sinais a montante provenientes de MAPK/ERK, PKC, sinalização por cálcio e vias de fatores de crescimento para controlar a transcrição associada à progressão do ciclo celular, diferenciação, apoptose e plasticidade sináptica. O EGR1 modula redes a jusante envolvidas no remodelamento da matriz extracelular, na sinalização de citocinas e quimiocinas e na atividade vascular e neuronal, tornando-se amplamente relevante para modelos de inflamação, fibrose e neuroadaptação. A atividade desregulada de EGR1 tem sido associada a fenótipos alterados de proliferação e resposta ao estresse em diversos contextos relevantes para doenças, sustentando sua utilidade como um nó mecanístico para a investigação de vias.

As Partículas de Ativação Lentivirais EGR1 (r) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais EGR1 (r) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição , onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de EGR1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.