Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
DUOX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403534
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DUOX2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DUOX2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DUOX2 Anticorpo (E-8): sc-398681
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DUOX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403534 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DUOX2 (dual oxidase 2) codifica uma oxidase de NADPH associada à membrana que gera peróxido de hidrogênio na superfície apical de células epiteliais, fornecendo substrato para reações mediadas por peroxidases e para sinalização dependente de redox. Como parte da defesa inata das mucosas, a atividade de DUOX2 é integrada à sinalização por cálcio, às respostas JAK/STAT induzidas por citocinas e às vias de estresse oxidativo que moldam a função de barreira e os programas antimicrobianos. A expressão ou atividade desregulada de DUOX2 tem sido associada à suscetibilidade à doença inflamatória intestinal, à inflamação crônica de mucosas e a interações alteradas entre hospedeiro e microbioma; além disso, é estudada no contexto da hormonogênese tireoidiana e da carcinogênese epitelial. Como as EROs derivadas de DUOX2 podem modular a sinalização de MAPK e NF-κB, ela é frequentemente investigada quanto a efeitos sobre proliferação, diferenciação e respostas a dano no DNA em modelos epiteliais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DUOX2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DUOX2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DUOX2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DUOX2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DUOX2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DUOX2 para a investigação da sinalização de DUOX2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DUOX2 críticos para a função DUOX2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DUOX2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DUOX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DUOX2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DUOX2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DUOX2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DUOX2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DUOX2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DUOX2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.