DENND2A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411968-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DENND2AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DENND2A (h) e o Plasmídeo Double Nickase DENND2A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DENND2A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DENND2A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-411968-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DENND2A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-411968-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DENND2A (DENN domain containing 2A) codifica um fator de troca de nucleotídeos de guanina (GEF) citosólico que ativa GTPases Rab envolvidas no tráfego de membranas, com funções descritas na regulação do transporte dependente de Rab9 e na dinâmica endossomo–Golgi. Por meio dessas vias de transporte vesicular, o DENND2A contribui para a triagem de cargas intracelulares, a organização de membranas e a compartimentalização de sinais, o que pode influenciar a polaridade e a motilidade celular. A expressão alterada ou a desregulação do DENND2A tem sido investigada no contexto da biologia tumoral, em que mudanças nos programas de tráfego e migração podem afetar fenótipos relacionados à invasão. Como regulador do tráfego, o DENND2A é um alvo útil para estudos mecanísticos que relacionam o transporte mediado por Rab à renovação de receptores, à homeostase de organelas e à sinalização responsiva ao estresse.
DENND2A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DENND2A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DENND2A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DENND2A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DENND2A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.