CYYR1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432449

Descripción general

Cyyr1 codifica la proteína rica en cisteína y tirosina 1 (CYYR1), una proteína conservada que se ha implicado en respuestas al estrés celular y en la señalización reguladora en la interfaz entre la organización del citoesqueleto y el control transcripcional. En modelos y sistemas celulares de ratón, la expresión de CYYR1 responde a señales inflamatorias y se ha vinculado a vías que gobiernan el comportamiento de células epiteliales e inmunitarias, incluidos procesos de remodelación que influyen en la adhesión y la migración. Aunque sus socios moleculares aún no están completamente definidos, CYYR1 se ha asociado con una regulación dependiente del contexto de programas de crecimiento y diferenciación. Se ha informado de una expresión desregulada de Cyyr1 en contextos relevantes para la remodelación tisular asociada a la inflamación y fenotipos oncogénicos, lo que respalda su utilidad como diana de investigación para estudios mecanísticos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CYYR1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cyyr1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cyyr1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cyyr1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CYYR1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cyyr1 para la investigación de la señalización de CYYR1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cyyr1 críticos para la función de CYYR1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cyyr1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CYYR1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CYYR1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cyyr1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CYYR1 (m) y el plásmido HDR CYYR1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cyyr1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cyyr1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.