CYYR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-432449

Übersicht

Cyyr1 kodiert „cysteine and tyrosine rich 1“ (CYYR1), ein konserviertes Protein, das mit zellulären Stressantworten und regulatorischer Signalgebung an der Schnittstelle zwischen Zytoskelettorganisation und transkriptioneller Kontrolle in Verbindung gebracht wurde. In Mausmodellen und Zellsystemen reagiert die CYYR1-Expression auf entzündliche Signale und wurde mit Signalwegen verknüpft, die das Verhalten von Epithel- und Immunzellen steuern, einschließlich Umbauprozessen, die Adhäsion und Migration beeinflussen. Obwohl seine molekularen Partner noch nicht vollständig definiert sind, wird CYYR1 mit einer kontextabhängigen Regulation von Wachstums- und Differenzierungsprogrammen assoziiert. Eine dysregulierte Cyyr1-Expression wurde in Zusammenhängen beschrieben, die für entzündungsassoziierten Gewebeumbau und onkogene Phänotypen relevant sind, was seinen Nutzen als Forschungsziel für mechanistische Studien unterstreicht.

Das CYYR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Cyyr1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Cyyr1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Cyyr1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CYYR1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Cyyr1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CYYR1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Cyyr1-Exone abzielen, die für die CYYR1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Cyyr1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CYYR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom CYYR1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Cyyr1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CYYR1 HDR-Plasmid (m) und CYYR1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Cyyr1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Cyyr1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.