cytochrome b5 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-430951-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cytochrome b5O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase cytochrome b5 (m) e o Plasmídeo Double Nickase cytochrome b5 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cyb5a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cytochrome b5 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-430951-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Cyb5a do camundongo codifica o citocromo b5, uma proteína heme associada à membrana que transfere elétrons para enzimas do citocromo P450, dessaturases de ácidos graxos e sistemas de elongação no retículo endoplasmático. Por meio dessas interações, o citocromo b5 sustenta o metabolismo oxidativo de xenobióticos e de substratos endógenos, a biossíntese de esteroides e lipídios e a homeostase redox. A atividade de Cyb5a pode influenciar as respostas celulares ao estresse oxidativo e o processamento metabólico de fármacos e hormônios, vinculando-o a vias relevantes para a função hepática e o equilíbrio lipídico sistêmico. Alterações na transferência de elétrons dependente de citocromo b5 têm sido associadas à desregulação do metabolismo lipídico e a perturbações na oxidação mediada por P450, tornando o Cyb5a um ponto útil para estudos mecanísticos em modelos metabólicos e toxicológicos.
cytochrome b5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cyb5a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cyb5a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cyb5a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cyb5a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.