Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CYP2S1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405785
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CYP2S1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CYP2S1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CYP2S1 Anticuerpo (G-1): sc-365806
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CYP2S1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405785 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CYP2S1 codifica el citocromo P450 2S1, una monooxigenasa extrahepática que cataliza el metabolismo oxidativo de lípidos endógenos y de sustratos xenobióticos. Se ha relacionado con la señalización del ácido araquidónico y de los eicosanoides, incluida la oxigenación de mediadores derivados de ácidos grasos que pueden influir en programas de inflamación y respuesta al estrés. La expresión de CYP2S1 está enriquecida en tejidos epiteliales y se regula por señales ambientales y oxidativas, lo que respalda su papel en la biología de barrera y la defensa química. La actividad o expresión desregulada de CYP2S1 se ha asociado con alteraciones en el manejo de xenobióticos y el equilibrio redox en contextos como la inflamación y la biología del cáncer, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de fenotipos impulsados por el metabolismo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CYP2S1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CYP2S1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CYP2S1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CYP2S1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CYP2S1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CYP2S1 para la investigación de la señalización de CYP2S1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CYP2S1 críticos para la función de CYP2S1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CYP2S1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CYP2S1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CYP2S1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CYP2S1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CYP2S1 (h) y el plásmido HDR CYP2S1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CYP2S1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CYP2S1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.