cyclin Y CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-426856

개요

마우스 Ccny 유전자는 세포막에 연관된 사이클린인 사이클린 Y를 암호화하며, 세포주기와 연동된 신호전달을 발달 및 대사 프로그램과 조율한다. 사이클린 Y는 CDK 활성 조절에 관여하고, 세포막에서 신호 구성요소를 제어함으로써 Wnt/β-카테닌 경로의 조절을 돕는 것으로 보고되어 왔으며, 그 결과 증식, 분화, 그리고 조직 항상성에 영향을 미친다. Ccny 발현과 사이클린에 의해 구동되는 신호전달의 역학은 줄기/전구세포의 행동, 신경 발달, 조직 리모델링과 같은 맥락에서 연구되는데, 이들 상황에서는 세포주기 조절 이상과 Wnt 신호의 이상이 공통적으로 나타난다. 따라서 Ccny 기능상실 모델은 사이클린 의존적 체크포인트 조절, 경로 간 크로스토크, 그리고 암 생물학 및 신경발달 연구와 관련된 표현형을 규명하는 데 유용하다.

cyclin Y CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ccny 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ccny 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ccny의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 cyclin Y 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 cyclin Y 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ccny 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• cyclin Y 기능에 중요한 Ccny 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ccny 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• cyclin Y CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 cyclin Y CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ccny 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  cyclin Y HDR 플라스미드 (m) 및 cyclin Y HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ccny 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ccny 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.