Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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CPOX Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419785
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CPOX Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico CPOX, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CPOX Antibody (B-9): sc-393388
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CPOX Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-419785 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Cpox codifica la coproporfirinogeno ossidasi (CPOX), un enzima mitocondriale che catalizza la decarbossilazione ossidativa del coproporfirinogeno III a protoporfirinogeno IX nella via di biosintesi dell’eme. Questo passaggio è essenziale per garantire la disponibilità cellulare di eme, che sostiene l’assemblaggio delle emoproteine, il metabolismo ossidativo e l’omeostasi redox, in particolare nei tessuti metabolicamente attivi. L’alterazione degli enzimi della via dell’eme può compromettere la funzione mitocondriale, indurre l’accumulo di intermedi porfirinici e modificare le risposte allo stress ossidativo. Cpox è quindi rilevante per studi sul metabolismo delle porfirine, sulla biologia mitocondriale e sui meccanismi alla base di fenotipi simili alla porfiria in modelli murini.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CPOX (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Cpox in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Cpox insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Cpox a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CPOX.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Cpox per lo studio della segnalazione di CPOX, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Cpox critici per la funzione di CPOX
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Cpox per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal CPOX CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal CPOX CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Cpox. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal CPOX Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR CPOX (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Cpox per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Cpox definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.