CIDE-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403808

Visão geral

CIDEB codifica a CIDE-B, um membro da família de proteínas que contêm o domínio CIDE, implicada na regulação da dinâmica das gotículas lipídicas, da homeostase energética e de processos associados à morte celular. Em tecidos humanos com metabolismo lipídico ativo, a CIDE-B contribui para vias que conectam o armazenamento e a renovação de lipídios neutros à sinalização metabólica, incluindo o metabolismo lipídico hepático e programas associados aos adipócitos. Alterações na expressão ou na função de CIDEB têm sido associadas a acúmulo lipídico desregulado e a fenótipos metabólicos relevantes para mecanismos de obesidade, resistência à insulina e doenças relacionadas ao fígado gorduroso. Por isso, o CIDEB é estudado pelo seu papel em coordenar a biologia das gotículas lipídicas com respostas ao estresse e a função mitocondrial em células metabolicamente ativas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CIDE-B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CIDEB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CIDEB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CIDEB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CIDE-B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CIDEB para a investigação da sinalização de CIDE-B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CIDEB críticos para a função CIDE-B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CIDEB para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CIDE-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CIDE-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CIDEB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CIDE-B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CIDE-B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CIDEB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CIDEB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.