Cdk6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400309

Visão geral

CDK6 codifica a quinase dependente de ciclina 6 (Cdk6), uma quinase de serina/treonina que se associa às ciclinas do tipo D para fosforilar proteínas da família RB e promover a progressão do ciclo celular da fase G1 para a fase S. A atividade da Cdk6 integra a sinalização mitogênica ao controlo de checkpoints através do eixo ciclina D–CDK4/6–RB–E2F e interage com vias que regulam proliferação, diferenciação e senescência. A expressão ou a sinalização desregulada de CDK6 é frequentemente associada a um controlo aberrante do ciclo celular no cancro e também está implicada em decisões de linhagem hematopoiética e em programas transcricionais inflamatórios. Devido ao seu papel central na coordenação da entrada no ciclo celular, o CDK6 é amplamente estudado na biologia tumoral, na regulação de células estaminais/progenitoras e nos mecanismos de resistência terapêutica ao nível das vias de sinalização.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Cdk6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDK6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDK6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDK6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Cdk6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDK6 para a investigação da sinalização de Cdk6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDK6 críticos para a função Cdk6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDK6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Cdk6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Cdk6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDK6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Cdk6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Cdk6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDK6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDK6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.