Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CD27L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423453
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD27L O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD27L, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD27L Anticorpo (G-7): sc-365539
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD27L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423453 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cd70 codifica a CD27L (CD70), um ligante de membrana do tipo II da superfamília do TNF que se liga ao CD27 em células T, células B e células NK para modular a sinalização coestimulatória. As interações CD27–CD70 moldam a ativação da imunidade adaptativa, sustentando a expansão, a sobrevivência e a diferenciação de linfócitos por meio de programas transcricionais a jusante ligados a NF-κB e MAPK. A regulação rigorosa da expressão de CD70 em células apresentadoras de antígeno ativadas ajuda a equilibrar o priming imune com a homeostase imunológica. A desregulação da sinalização de CD70 tem sido implicada em respostas inflamatórias aberrantes, dinâmica alterada de centros germinativos e desregulação imune relevante para pesquisas em autoimunidade e imunobiologia do câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD27L (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cd70 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cd70, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cd70 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD27L.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cd70 para a investigação da sinalização de CD27L, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cd70 críticos para a função CD27L
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cd70 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD27L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD27L Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cd70. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD27L Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD27L (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cd70 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cd70 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.