Plasmide Double Nickase (h) CBX7: sc-402903-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CBX7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CBX7 Double Nickase (h) et le plasmide CBX7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CBX7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CBX7 Antibody (G-3): sc-376274
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CBX7 | sc-402903-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CBX7 | sc-402903-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CBX7 (chromobox 7) code une protéine à domaine chromodomaine du groupe Polycomb, capable de reconnaître H3K27me3, et contribue à l’assemblage des complexes PRC1 canoniques afin de favoriser la compaction de la chromatine et une répression transcriptionnelle stable. En régulant des programmes géniques du développement, les points de contrôle du cycle cellulaire et la sénescence cellulaire, CBX7 participe au maintien de la mémoire épigénétique et d’états transcriptionnels spécifiques de lignée. Une activité de CBX7 dérégulée a été associée à des altérations de la différenciation et du contrôle de la prolifération dans plusieurs contextes pathologiques, notamment les cancers, où des changements dans le silençage médié par Polycomb peuvent remodeler des réseaux oncogéniques et de suppresseurs de tumeurs. En tant que lecteur de chromatine au sein des voies Polycomb, CBX7 est fréquemment étudié pour comprendre comment les marques d’histones sont interprétées afin de contrôler les sorties transcriptionnelles à l’échelle du génome.
CBX7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CBX7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CBX7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CBX7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CBX7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.