非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CBS 抗体 (B-4): sc-133154. 未转染 293T: sc-117752 (A), 转染人 CBS 的 293T: sc-170537 (B) 和 HeLa (C) 全细胞裂解液中 CBS 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CBS CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-400877
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CBS CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在CBS基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CBS: sc-133154，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CBS CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-400877 | 20 µg | $397.00 |
概述
胱硫醚β-合成酶（CBS）是一种依赖磷酸吡哆醛（PLP）的酶，催化丝氨酸与同型半胱氨酸缩合生成胱硫醚，从而将同型半胱氨酸导入转硫途径。CBS通过连接一碳代谢与半胱氨酸生物合成，借由下游谷胱甘肽的生成影响细胞氧化还原平衡，并有助于维持含硫氨基酸稳态。CBS活性还支持内源性硫化氢的生成，从而影响线粒体功能及应激响应信号传导。CBS失调与高同型半胱氨酸血症及硫代谢先天性错误相关；在与心血管和神经发育表型相关的氧化应激与代谢重编程背景下，CBS表达改变也已被广泛研究。
CBS CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CBS基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CBS基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CBS开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使CBS蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CBS缺失的细胞模型，用于CBS信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 CBS 功能至关重要的 CBS 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CBS 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 CBS CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 CBS CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CBS 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 CBS HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 CBS HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CBS同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CBS靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。