Date published: 2026-7-10

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caspase-8 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419469-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: mouse
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • caspase-8O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase caspase-8 (m) e o Plasmídeo Double Nickase caspase-8 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Casp8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:caspase-8 p18 Anticorpo (D-8): sc-5263
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    caspase-8 Plasmídeo duplo de Nickase (m)

    sc-419469-NIC
    20 µg
    $410.00

    caspase-8 Plasmídeo duplo de Nickase (m2)

    sc-419469-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    O gene Casp8 em camundongo codifica a caspase-8, uma protease iniciadora de cisteína que conecta a ativação de receptores de morte às cascatas de caspases a jusante e à execução da apoptose. Além da apoptose, a caspase-8 modula a sinalização inflamatória ligada ao NF-κB e restringe a necroptose ao regular a ativação da via RIPK1/RIPK3–MLKL, moldando assim as respostas imunes inatas e as decisões de destino celular. A atividade ou expressão desregulada da caspase-8 está associada a alterações na homeostase de linfócitos, sinalização aberrante de citocinas e defeitos no remodelamento tecidual. Essas funções tornam o Casp8 um nó-chave para estudar a apoptose extrínseca, a comunicação cruzada entre vias inflamatórias e o equilíbrio da morte celular programada em modelos murinos de fenótipos imunes e neuroinflamatórios.

    caspase-8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Casp8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Casp8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Casp8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Casp8 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.