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caspase-4 p20双切口酶质粒(h) | sc-400858-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
caspase-4 p20双切口酶质粒(h2) | sc-400858-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 CASP4 基因编码 caspase-4,这是一种炎症性半胱天冬酶,参与先天免疫信号传导以及与细胞焦亡相关的蛋白酶级联反应。Caspase-4 可被胞质内脂多糖直接激活,并促进非经典炎症小体信号传导,包括切割 gasdermin D,以及通过炎症小体串扰促进下游细胞因子成熟。该通路还与内质网应激反应及更广泛的炎症程序相整合,从而影响上皮细胞和髓系细胞的稳态。CASP4 活性失调与炎症状态增强有关,并已在脓毒症生物学、肠道炎症以及肿瘤相关炎症等研究情境中受到关注。
caspase-4 p20 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CASP4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CASP4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CASP4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CASP4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。