CA XI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419451
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CA XI O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CA XI, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CA XI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419451 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Car11 do camundongo codifica a anidrase carbônica XI (CA XI), um membro da família das anidrases carbônicas que se acredita contribuir para a regulação do pH celular e para o manejo de bicarbonato/CO₂ em microambientes metabólicos, embora sua atividade catalítica seja descrita como atípica em comparação com as anidrases carbônicas clássicas. A expressão de CA XI tem sido associada a tecidos neurais, implicando o Car11 em processos ligados à fisiologia neuronal e à homeostase de íons/pH. Por meio de efeitos sobre o equilíbrio ácido–base intra e extracelular, o Car11 pode cruzar-se com vias que influenciam o metabolismo celular, a diferenciação e a adaptação ao microambiente. O controle de pH desregulado e a expressão alterada de membros da família das anidrases carbônicas são relevantes para estudos de neurobiologia e de remodelamento metabólico associado a doenças em modelos experimentais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CA XI (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Car11 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Car11, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Car11 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CA XI.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Car11 para a investigação da sinalização de CA XI, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Car11 críticos para a função CA XI
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Car11 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CA XI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CA XI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Car11. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CA XI Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CA XI (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Car11 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Car11 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.