Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CA IV (m): sc-419454
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CA IV Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CA IV, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CA IV Antibody (H-5): sc-74446
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CA IV (m) | sc-419454 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **Car4** code l’anhydrase carbonique IV (CA IV), une enzyme extracellulaire ancrée par GPI qui catalyse l’hydratation réversible du CO₂ en bicarbonate et en protons, contribuant ainsi à la régulation locale du pH et au transport du bicarbonate. En se couplant fonctionnellement aux processus de transport ionique, la CA IV participe à l’homéostasie CO₂/HCO₃⁻, qui influence la physiologie épithéliale et endothéliale, les échanges gazeux et l’équilibre acido-basique du microenvironnement. L’activité de Car4 est fréquemment étudiée dans le contexte de la gestion du bicarbonate au niveau pulmonaire et rénal, ainsi que des réponses tissulaires aux variations de pH et de CO₂. Une dérégulation du tamponnement dépendant des anhydrases carboniques peut affecter des processus liés à l’inflammation, au remodelage associé à l’hypoxie et aux voies de stress métabolique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CA IV (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Car4 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Car4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Car4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CA IV.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Car4 pour l'étude de la signalisation de CA IV, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Car4 essentiels à la fonction de CA IV
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Car4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CA IV plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CA IV plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Car4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CA IV plasmide HDR (m) et le CA IV (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Car4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Car4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.