C3aR CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419392

概要

マウスC3ar1は、補体活性化の過程で産生されるアナフィラトキシンC3aに結合するGタンパク質共役型受容体である補体成分3a受容体（C3aR）をコードします。C3aRシグナルは、白血球の走化性、脱顆粒、サイトカイン放出、血管反応を調節し、自然免疫のシグナルをMAPK、PI3K/AKT、およびカルシウム依存性経路などの下流経路へと統合します。骨髄系細胞、ミクログリア、その他の免疫応答性コンパートメントにおいて、C3aRは状況に応じて炎症の収束にも増幅にも寄与します。C3aR活性の制御異常は、アレルギー性気道炎症、自己免疫性病態、感染に伴う免疫病理、神経炎症過程のモデルで関与が示唆されています。

C3aR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるC3ar1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、C3ar1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、C3ar1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、C3aRタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、C3aRシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、C3ar1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• C3aRの機能に不可欠なC3ar1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、C3ar1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• C3aR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびC3aR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、C3ar1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  C3aR HDRプラスミド（m）および C3aR HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはC3ar1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のC3ar1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。