Biglycan Lentiviral Activation Particles (h): sc-401408-LAC

BGN kodiert Biglycan, ein kleines leucinreiches Proteoglykan der extrazellulären Matrix, das an Kollagene bindet und die Fibrillogenese, die Hydratation der Matrix sowie die Gewebemechanik reguliert. Biglycan moduliert die Zell‑Matrix‑Signalübertragung, indem es Integrine und Wachstumsfaktor‑Signalwege einbindet, und beeinflusst dadurch Prozesse wie Adhäsion, Migration und inflammatorische Signalgebung. Es ist an der Umgestaltung der extrazellulären Matrix und an fibroproliferativen Programmen beteiligt, was für die Biologie des Bindegewebes und stromale Beiträge zu Erkrankungen relevant ist. Eine dysregulierte BGN‑Expression wurde mit pathologischer Matrixablagerung und veränderter Signalübertragung in Zusammenhängen wie Fibrose, vaskulärem Remodeling und Untersuchungen zur Tumormikroumgebung in Verbindung gebracht.

Biglycan Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente BGN-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Biglycan Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der BGN-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Biglycan-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen BGN-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.