Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
AWP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425748
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AWP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico AWP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AWP1 Anticorpo (B-5): sc-398513
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AWP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425748 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Zfand6 codifica a AWP1, uma proteína com domínio AN1 do tipo “zinc finger”, implicada na regulação dependente de ubiquitina da renovação/degradação de proteínas e na sinalização de estresse celular. A AWP1 tem sido associada à modulação de vias inflamatórias e da imunidade inata, incluindo a sinalização de NF-κB, por meio de interações com substratos ubiquitinados e com componentes de redes de ligases de ubiquitina. Em sistemas murinos, a expressão e a função de Zfand6 são estudadas no contexto da proteostase, da transdução de sinais e das respostas celulares a citocinas e ao estresse. A desregulação do controle mediado por ubiquitina e da sinalização inflamatória é amplamente relevante para mecanismos subjacentes à biologia do câncer, à neurodegeneração e a patologias mediadas pelo sistema imune, tornando Zfand6 um alvo útil para investigação de vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO AWP1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Zfand6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Zfand6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Zfand6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína AWP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Zfand6 para a investigação da sinalização de AWP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Zfand6 críticos para a função AWP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Zfand6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo AWP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo AWP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Zfand6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo AWP1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR AWP1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Zfand6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Zfand6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.