Plásmido Doble Nickase (h) Arginase 2/ARG2: sc-400639-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Arginase 2/ARG2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Arginase 2/ARG2 (h) y el plásmido de doble nickasa Arginase 2/ARG2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ARG2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Arginase 2/ARG2 Anticuerpo (A-10): sc-393496
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Arginase 2/ARG2 | sc-400639-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Arg2 | sc-400639-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El ARG2 humano codifica la arginasa 2, una enzima mitocondrial dependiente de manganeso que hidroliza la L-arginina a L-ornitina y urea, conectando el catabolismo de aminoácidos con el ciclo de la urea y las vías biosintéticas de poliaminas y prolina. Al competir con las sintasas de óxido nítrico por la L-arginina, ARG2 puede modular la disponibilidad de óxido nítrico y los programas de señalización redox, inflamatoria y vascular aguas abajo. La actividad de ARG2 se integra con el metabolismo mitocondrial y la polarización funcional de las células inmunitarias, influyendo en la proliferación celular y las respuestas al estrés a través de poliaminas derivadas de la ornitina. La desregulación del metabolismo de la arginina y la expresión alterada de ARG2 se han asociado con estados cardiometabólicos e inflamatorios, y se han investigado en contextos como la competencia por nutrientes en el microambiente tumoral y la disfunción endotelial.
Arginase 2/ARG2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ARG2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ARG2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ARG2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ARG2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.