Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
APC Antibody (F-3): sc-9998. Western blot analysis of APC expression in Jurkat (A), NIH/3T3 (B), HeLa (C) and Hep G2 (D) whole cell lysates.
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APC双切口酶质粒(h): sc-400374-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- APC 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- APC双切酶质粒（h）和APC双切酶质粒（h2）编码针对APC的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：APC: sc-9998，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
APC双切口酶质粒(h) | sc-400374-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
APC双切口酶质粒(h2) | sc-400374-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APC 编码腺瘤性息肉病结肠蛋白（adenomatous polyposis coli），是一种多功能肿瘤抑制因子，可作为支架蛋白组装 β-连环蛋白（β-catenin）降解复合体，从而调控经典 Wnt 信号通路及其控制细胞增殖与分化的转录程序。除对 Wnt 通路的调控外，APC 还通过与微管、肌动蛋白相关因子以及动粒组分的相互作用，协同调节细胞骨架动态、细胞极性和染色体分离。APC 功能受损与 β-连环蛋白异常稳定、细胞命运决定改变以及基因组不稳定性密切相关，使 APC 成为研究肠上皮稳态与致癌信号机制的关键枢纽。因此，人源 APC 被广泛用于结直肠癌模型及其他 Wnt 驱动表型中，用以探究信号通路重编程过程。
APC 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 APC 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对APC内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏APC的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了APC基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。