Plásmido Doble Nickase (h) Annexin XI: sc-404879-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Annexin XI consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Annexin XI (h) y el plásmido de doble nickasa Annexin XI (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ANXA11. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Annexin XI Anticuerpo (D-12): sc-46686
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Annexin XI | sc-404879-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Annexin XI | sc-404879-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANXA11 codifica la anexina XI, una proteína de unión a fosfolípidos dependiente de Ca2+ que se asocia con membranas intracelulares y participa en el tráfico de membranas, la dinámica vesicular y la organización del citoesqueleto. La anexina XI se ha vinculado a procesos endosómicos y lisosomales, incluidos papeles en la función del endosoma tardío y en vías relacionadas con la autofagia, y su actividad de unión a membranas está modulada por la señalización de calcio. Estudios celulares implican a ANXA11 en ensamblajes sensibles al estrés y en la dinámica de los gránulos de ARN, conectándola con la proteostasis y la homeostasis de orgánulos. Alteraciones genéticas y funcionales de ANXA11 se han asociado con la biología de enfermedades neurodegenerativas y neuromusculares, lo que la hace relevante para la investigación mecanística sobre la agregación de proteínas, el mantenimiento axonal y las respuestas celulares al estrés.
Annexin XI El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ANXA11 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ANXA11. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ANXA11. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ANXA11 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.