ADH7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-419006-KO-2

Descripción general

Adh7 codifica la alcohol deshidrogenasa 7 (ADH7), una oxidorreductasa dependiente de NAD que contribuye al metabolismo de los retinoides y de una variedad de sustratos alcohólicos y aldehídicos, influyendo así en el equilibrio redox celular y en la capacidad de detoxificación. En los tejidos de ratón donde se expresa, la actividad de ADH7 puede participar en pasos de conversión de retinol a retinal que alimentan la señalización del ácido retinoico, una vía central para los programas de diferenciación y la homeostasis epitelial. Las alteraciones en el manejo de aldehídos y en el metabolismo de retinoides se asocian con frecuencia a respuestas de estrés oxidativo y a una regulación anómala del control del crecimiento, lo que convierte a Adh7 en un punto de interés para estudiar las contribuciones metabólicas a la remodelación tisular y a fenotipos relevantes para enfermedad. Dado que el metabolismo de alcoholes/aldehídos también afecta la señalización lipídica e inflamatoria, la perturbación de Adh7 puede aprovecharse para explorar la comunicación cruzada entre enzimas metabólicas y programas transcripcionales aguas abajo de redes reguladas por retinoides.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ADH7 (m2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Adh7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Adh7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Adh7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ADH7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Adh7 para la investigación de la señalización de ADH7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Adh7 críticos para la función de ADH7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Adh7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ADH7 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ADH7 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Adh7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ADH7 (m) y el plásmido HDR ADH7 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Adh7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Adh7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.