Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Adducin α (h): sc-401693
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Adducin α Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Adducin α, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Adducin α Antibody (4D1): sc-33633
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Adducin α (h) | sc-401693 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
ADD1 code pour l’adducine α, une protéine du cytosquelette membranaire qui coiffe les filaments d’actine et favorise l’assemblage du réseau spectrine–actine au niveau du cortex cellulaire. En régulant le remodelage du cytosquelette, l’adducine α influence la forme cellulaire, l’adhérence et la stabilité membranaire, avec des effets en aval sur des processus tels que la migration cellulaire et la mécanotransduction. La fonction de l’adducine est modulée par des signalisations dépendantes de la phosphorylation, notamment des voies liées à la PKC et à la PKA, qui modifient la dynamique de liaison à l’actine et l’organisation corticale. La dérégulation de protéines d’échafaudage du cytosquelette et de la membrane, dont ADD1, a été associée à des altérations des propriétés de barrière épithéliale et à des phénotypes cellulaires pertinents pour la recherche cardiovasculaire et neurobiologique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Adducin α (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ADD1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ADD1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ADD1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Adducin α.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ADD1 pour l'étude de la signalisation de Adducin α, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de ADD1 essentiels à la fonction de Adducin α
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ADD1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Adducin α plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Adducin α plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ADD1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Adducin α plasmide HDR (h) et le Adducin α (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ADD1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ADD1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.