Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
α1A-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401726
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- α1A-AR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico α1A-AR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α1A-AR Anticorpo (4D8): sc-100291
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
α1A-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401726 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ADRA1A codifica o receptor adrenérgico humano α1A (α1A-AR), um receptor acoplado à proteína G que se acopla preferencialmente a Gq/11 para ativar a fosfolipase C, elevar o Ca2+ intracelular e estimular sinalização dependente de PKC. O α1A-AR regula a contração do músculo liso, o tônus vascular e a neurotransmissão, e pode acionar vias a jusante de MAPK/ERK que influenciam a proliferação celular e programas de transcrição. A atividade do receptor contribui para o controle adrenérgico da fisiologia cardiovascular e geniturinária e modula redes de sinalização responsivas ao estresse em múltiplos tecidos. A desregulação da sinalização adrenérgica e alterações na expressão de ADRA1A têm sido investigadas em contextos como hipertensão, função do trato urinário inferior e sinalização no microambiente tumoral, oferecendo um ponto de entrada mecanístico para pesquisas focadas em vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO α1A-AR (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADRA1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADRA1A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADRA1A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína α1A-AR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADRA1A para a investigação da sinalização de α1A-AR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADRA1A críticos para a função α1A-AR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADRA1A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo α1A-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo α1A-AR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADRA1A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo α1A-AR Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR α1A-AR (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADRA1A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADRA1A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.