就 2500003M10Rik 激活剂而言,HTS 方法的核心是对 2500003M10Rik 基因的转录活性敏感的报告基因检测系统。通常情况下,在 2500003M10Rik 基因的调控序列下放置一个可产生荧光或发光信号的报告基因。当筛选文库中的化合物成功激活该启动子时,就会触发报告基因的表达,从而产生可检测到的信号。信号的强度与启动子的活性相关,进而与化合物作为激活剂的潜力相关。通过 HTS 分离出 2500003M10Rik 基因的潜在激活剂后,要对其进行一系列验证试验,以确认其活性。主要验证方法之一是定量聚合酶链反应 (qPCR),该方法可精确定量 2500003M10Rik 基因与化合物相互作用后的 mRNA 水平。
与未处理的对照组相比,观察到的 mRNA 数量激增表明,化合物可在转录水平上提高基因表达。此外,为了验证 mRNA 的增加是否转化为蛋白质的产生,还进行了 Western 印迹分析。这种技术可对 2500003M10Rik 基因编码的特定蛋白质进行可视化和定量分析。如果使用该化合物的细胞中出现更高水平的蛋白质,则可证实该化合物具有激活剂的功能。通过整合 qPCR 和 Western 印迹数据,研究人员可以确认该化合物不仅能提高 mRNA 水平,还能确保相应蛋白质的合成得到加强。这些严格的分析方法对于全面评估该化合物对基因表达途径(从转录到蛋白质合成)的影响至关重要,从而建立起该化合物对 2500003M10Rik 基因激活特性的清晰轮廓。
関連項目
产品名称 | CAS # | 产品编号 | 数量 | 价格 | 应用 | 排名 |
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(−)-Epigallocatechin Gallate | 989-51-5 | sc-200802 sc-200802A sc-200802B sc-200802C sc-200802D sc-200802E | 10 mg 50 mg 100 mg 500 mg 1 g 10 g | $42.00 $72.00 $124.00 $238.00 $520.00 $1234.00 | 11 | |
EGCG是一种激酶抑制剂,可减少竞争性磷酸化,从而选择性地增强磷酸化2500003M10Rik的激酶活性,使其活性增强。 | ||||||
LY 294002 | 154447-36-6 | sc-201426 sc-201426A | 5 mg 25 mg | $121.00 $392.00 | 148 | |
LY294002 是一种 PI3K 抑制剂。通过抑制 PI3K,它可以改变 AKT 等下游信号通路,从而可能导致一种增强 2500003M10Rik 活性的补偿机制。 | ||||||
Wortmannin | 19545-26-7 | sc-3505 sc-3505A sc-3505B | 1 mg 5 mg 20 mg | $66.00 $219.00 $417.00 | 97 | |
另一种 PI3K 抑制剂 Wortmannin 也会对 PI3K/AKT 通路产生类似的影响,从而导致通过间接调节信号网络来增强 2500003M10Rik 活性的变化。 | ||||||
SB 203580 | 152121-47-6 | sc-3533 sc-3533A | 1 mg 5 mg | $88.00 $342.00 | 284 | |
SB203580是一种p38 MAPK抑制剂。通过抑制p38,它可以改变细胞信号传导的平衡,从而增强2500003M10Rik参与的途径,导致蛋白活性增加。 | ||||||
A23187 | 52665-69-7 | sc-3591 sc-3591B sc-3591A sc-3591C | 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg | $54.00 $128.00 $199.00 $311.00 | 23 | |
A23187 是一种钙离子促进剂。细胞内钙的升高可激活钙依赖性信号通路,进而增强 2500003M10Rik 的活性。 | ||||||
Staurosporine | 62996-74-1 | sc-3510 sc-3510A sc-3510B | 100 µg 1 mg 5 mg | $82.00 $150.00 $388.00 | 113 | |
作为一种广谱激酶抑制剂,石杉碱甲可抑制对 2500003M10Rik 起负向调节作用的激酶,从而间接提高其活性。 | ||||||
D-erythro-Sphingosine-1-phosphate | 26993-30-6 | sc-201383 sc-201383D sc-201383A sc-201383B sc-201383C | 1 mg 2 mg 5 mg 10 mg 25 mg | $162.00 $316.00 $559.00 $889.00 $1693.00 | 7 | |
鞘氨醇-1-磷酸通过 G 蛋白偶联受体发挥作用,可能会影响增强 2500003M10Rik 活性的信号通路。 | ||||||
Thapsigargin | 67526-95-8 | sc-24017 sc-24017A | 1 mg 5 mg | $94.00 $349.00 | 114 | |
Thapsigargin 可抑制 SERCA 泵,从而破坏钙稳态,使细胞膜钙升高,激活信号通路,增强 2500003M10Rik 的活性。 | ||||||
Genistein | 446-72-0 | sc-3515 sc-3515A sc-3515B sc-3515C sc-3515D sc-3515E sc-3515F | 100 mg 500 mg 1 g 5 g 10 g 25 g 100 g | $26.00 $92.00 $120.00 $310.00 $500.00 $908.00 $1821.00 | 46 | |
染料木素是一种酪氨酸激酶抑制剂,可减轻酪氨酸激酶对 2500003M10Rik 的负面调节作用,从而提高其活性。 |