FCM Fixation buffer (10X)

O tampão de fixação para citometria de fluxo (FCM) (10X) é um reagente crucial utilizado na investigação imunológica e de biologia celular, particularmente em aplicações de citometria de fluxo. Este tampão especializado é meticulosamente formulado para preservar as estruturas celulares e os epítopos antigénicos, permitindo assim uma análise precisa e fiável das populações celulares. A composição do Tampão de Fixação FCM (10X) inclui normalmente paraformaldeído (PFA) como agente fixador primário, juntamente com outros constituintes, tais como tampão de fosfato de sódio e sacarose. O PFA reage com as proteínas celulares, formando ligações cruzadas que imobilizam as estruturas celulares e impedem a degradação ou alteração dos epítopos antigénicos. O tampão de fosfato de sódio mantém a estabilidade do pH da solução, assegurando condições de fixação óptimas, enquanto a sacarose ajuda a manter a osmolaridade celular e a minimizar a contração ou o inchaço das células durante a fixação. Em experiências de citometria de fluxo, o tampão de fixação FCM (10X) é utilizado para parar os processos celulares e preservar a morfologia celular e os padrões de expressão proteica. As células são primeiramente tratadas com o tampão, que penetra rapidamente na membrana celular e liga as proteínas intracelulares por contacto. Esta etapa de fixação imobiliza eficazmente os componentes celulares, incluindo os antigénios, no interior da célula, preservando a sua distribuição espacial e abundância relativa. Os investigadores utilizam o Tampão de Fixação FCM (10X) em várias aplicações de citometria de fluxo, incluindo imunofenotipagem, análise do ciclo celular e coloração intracelular. Após a fixação, as células podem ser permeabilizadas para permitir o acesso de anticorpos ou corantes fluorescentes a alvos intracelulares, permitindo a análise multiparamétrica da expressão proteica e das funções celulares. A otimização das condições de fixação, incluindo a concentração do tampão, o tempo de fixação e a temperatura, é essencial para obter resultados óptimos em experiências de citometria de fluxo. Uma fixação inadequada pode levar à aglomeração de células, à perda de antigenicidade ou à ligação não específica de anticorpos, afectando negativamente a qualidade e a interpretação dos dados.