ZIP10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406811
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ZIP10 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ZIP10, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ZIP10 Anticorpo (1F6): sc-517167
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ZIP10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406811 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SLC39A10 codifica o ZIP10, um transportador de influxo de zinco na membrana plasmática da família SLC39/ZIP, que regula a disponibilidade de Zn2+ no citosol para a atividade de metaloenzimas, fatores de transcrição do tipo dedo de zinco e sinalização sensível ao estado redox. Ao controlar a homeostase do zinco, o ZIP10 influencia vias associadas à proliferação celular, diferenciação e respostas ao estresse, incluindo cascatas de sinalização moldadas pela modulação, dependente de zinco, das atividades de quinases e fosfatases. Alterações na expressão do ZIP10 ou no manejo do zinco têm sido associadas na literatura à função de células imunes, à biologia epitelial e a fenótipos relacionados a tumores, refletindo a ampla dependência dos programas celulares da disponibilidade de zinco. Essas características tornam o SLC39A10 um alvo relevante para estudos mecanísticos de redes de sinalização reguladas por zinco e da biologia do transporte de íons metálicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ZIP10 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC39A10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC39A10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC39A10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ZIP10.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC39A10 para a investigação da sinalização de ZIP10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC39A10 críticos para a função ZIP10
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC39A10 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ZIP10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ZIP10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC39A10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ZIP10 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ZIP10 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC39A10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC39A10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.