Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
VAMP-2 Antibody (3E5): sc-69706. Western blot analysis of VAMP-2 expression in non-transfected: sc-117752 (A) and mouse VAMP-2 transfected: sc-126209 (B) 293T whole cell lysates.
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VAMP-2双切口酶质粒(m): sc-423650-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- VAMP-2 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- VAMP-2双切酶质粒（m）和VAMP-2双切酶质粒（m2）编码针对Vamp2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：VAMP-2: sc-69706，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
VAMP-2双切口酶质粒(m) | sc-423650-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VAMP-2双切口酶质粒(m2) | sc-423650-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Vamp2 编码囊泡相关膜蛋白 2（VAMP-2；synaptobrevin-2），这是一种核心 v-SNARE，可与 SNAP25、syntaxin 等 t-SNARE 配对，在受调控的胞吐过程中驱动膜融合。在小鼠神经元和神经内分泌细胞中，VAMP-2 对突触囊泡停靠和神经递质释放至关重要，同时也参与与内体到质膜回收相关的囊泡运输步骤。通过由 NSF/α-SNAP 协同调控的 SNARE 复合体组装与解离循环，VAMP-2 有助于维持突触前囊泡周转及与刺激耦联的分泌。SNARE 功能及囊泡融合动力学的改变，已在神经发育与神经退行性疾病机制，以及与分泌依赖性信号相关的代谢表型研究中被广泛关注。
VAMP-2 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Vamp2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Vamp2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Vamp2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Vamp2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。