UGT2B10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404210

Descripción general

UGT2B10 codifica una UDP‑glucuronosiltransferasa humana que cataliza reacciones de glucuronidación, aumentando la solubilidad y facilitando la eliminación de metabolitos endógenos y xenobióticos. Como enzima metabólica de fase II, UGT2B10 contribuye a vías de desintoxicación hepáticas y extrahepáticas que regulan la homeostasis de moléculas pequeñas y las respuestas de defensa frente a compuestos químicos. La variación o la expresión alterada de UGT2B10 puede modificar los perfiles de conjugados glucurónidos, con impacto en la farmacocinética, la señalización impulsada por metabolitos y las respuestas celulares al estrés. Estas propiedades hacen que UGT2B10 sea relevante para estudios de metabolismo de fármacos, biología de la exposición ambiental y desregulación metabólica asociada a fenotipos de enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO UGT2B10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen UGT2B10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del UGT2B10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de UGT2B10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína UGT2B10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en UGT2B10 para la investigación de la señalización de UGT2B10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de UGT2B10 críticos para la función de UGT2B10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de UGT2B10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido UGT2B10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido UGT2B10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus UGT2B10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR UGT2B10 (h) y el plásmido HDR UGT2B10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología UGT2B10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana UGT2B10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.