UBE2E1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423577

개요

Ube2e1은 유비퀴틴 결합(E2) 효소인 UBE2E1을 암호화하며, E3 리가아제와 협력해 기질 단백질에 유비퀴틴을 전달함으로써 단백질 항상성(proteostasis)과 단백질 턴오버를 형성합니다. 유비퀴틴화에서의 역할을 통해 UBE2E1은 핵심 조절 단백질의 안정성과 활성을 조절하여 세포주기 진행, DNA 손상 반응, 그리고 스트레스 적응 신호전달의 조절에 기여합니다. E2 효소 활성의 교란은 유비퀴틴 의존적 품질 관리 및 신호전달 네트워크를 붕괴시킬 수 있으며, 이러한 과정은 신경퇴행, 염증, 종양성 전환과 자주 연관됩니다. 마우스 모델에서 Ube2e1은 조직 및 질환 관련 맥락에서 E2 계열 구성원들 간 유비퀴틴 경로의 특이성과 기능적 중복성을 규명하기 위한 분석 가능한(tractable) 핵심 노드를 제공합니다.

UBE2E1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ube2e1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ube2e1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ube2e1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 UBE2E1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 UBE2E1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ube2e1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• UBE2E1 기능에 중요한 Ube2e1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ube2e1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• UBE2E1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 UBE2E1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ube2e1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  UBE2E1 HDR 플라스미드 (m) 및 UBE2E1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ube2e1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ube2e1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.