TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423405

Visão geral

Nkx2-1 codifica o TTF-1 (fator de transcrição da tiroide 1), um fator de transcrição com domínio homeobox que coordena programas de especificação de linhagem e de diferenciação na tiroide, no epitélio pulmonar e em regiões do prosencéfalo ventral. O NKX2-1 regula redes génicas envolvidas na identidade epitelial, na morfogénese e na função secretora, incluindo vias que controlam a produção de surfactante e a biossíntese de hormonas tiroideias. Por meio da ligação a enhancers e de interações cooperativas com outros reguladores do desenvolvimento, ajuda a manter estados de transcrição específicos de tecido e a acessibilidade da cromatina. A atividade ou expressão desregulada de NKX2-1 está associada a anomalias do desenvolvimento e é frequentemente estudada no contexto da biologia de doenças da tiroide e do pulmão, bem como da tumorigénese associada a linhagens e de transições de destino celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nkx2-1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nkx2-1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nkx2-1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nkx2-1 para a investigação da sinalização de TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nkx2-1 críticos para a função TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nkx2-1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nkx2-1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TTF-1/Thyroid Transcription Factor 1/NKX2-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nkx2-1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nkx2-1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.