Tris Acetate-EDTA buffer, 50X

O tampão Tris Acetato-EDTA (TAE), geralmente referido na sua forma concentrada como TAE 50X, é uma solução tampão amplamente utilizada em biologia molecular, particularmente para a separação electroforética de ácidos nucleicos. Este tampão é composto por uma mistura de base Tris (Tris(hidroximetil)aminometano), ácido acético e EDTA (ácido etileno diamino tetra-acético). O papel principal do tampão TAE é manter um pH estável durante a eletroforese, o que é crucial para a migração consistente do ADN através dos géis de agarose. O tampão TAE facilita o movimento do ADN sob um campo elétrico, fornecendo iões que transportam corrente e ajudam a estabilizar o ambiente de carga em torno das moléculas de ADN. O componente EDTA do tampão actua como um agente quelante; liga-se a iões metálicos divalentes como o Mg²⁺ e o Ca²⁺, que são cofactores necessários para as nucleases. Ao sequestrar estes iões, o EDTA inibe a atividade enzimática que, de outra forma, poderia degradar os ácidos nucleicos durante o processo de eletroforese. As aplicações de investigação do tampão TAE não se limitam à simples eletroforese em gel de ADN. Também é utilizado em técnicas de biologia molecular mais complexas, como a eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE) e a eletroforese em gel de inversão de campo (FIGE), em que a sua capacidade de tamponamento ajuda a gerir as alterações na orientação e força do campo elétrico, apoiando assim a separação de fragmentos de ADN muito grandes. A capacidade de tamponamento ligeiramente inferior do TAE, em comparação com outros tampões como o TBE (Tris-Borato-EDTA), pode ser vantajosa nestas aplicações porque permite uma melhor resolução de fragmentos de ADN de maiores dimensões à custa de uma recirculação mais frequente do tampão para evitar mudanças de pH durante ciclos prolongados.