Tris Acetate-EDTA buffer

O tampão Tris Acetato-EDTA (TAE) é um reagente fundamental na investigação em biologia molecular, utilizado principalmente na eletroforese de ácidos nucleicos e na análise de gel de ADN/ARN. Este tampão é meticulosamente formulado para proporcionar condições óptimas para a separação e visualização de fragmentos de ácido nucleico com base no tamanho. A composição do tampão TAE inclui normalmente três componentes principais: Tris(hidroximetil)aminometano (Tris), ácido acético (acetato) e ácido etilenodiaminotetracético (EDTA). O Tris funciona como agente tampão, mantendo um pH estável de cerca de 8,0, o que favorece a estabilidade e a eletroforese do ADN e do ARN. O ácido acético actua como um contra-ião, proporcionando condutividade à solução tampão. O EDTA quelata catiões divalentes, como os iões de magnésio, que, de outro modo, poderiam promover interacções não específicas dos ácidos nucleicos ou degradar os ácidos nucleicos por nucleases. Na investigação, o tampão TAE é normalmente utilizado na eletroforese em gel de agarose para separar fragmentos de ADN gerados por digestão com enzimas de restrição, reação em cadeia da polimerase (PCR) ou outras técnicas de manipulação de ácidos nucleicos. A capacidade de tamponamento e a força iónica do tampão permitem a migração eficaz dos fragmentos de ácido nucleico através da matriz do gel sob a influência de um campo elétrico. Após a eletroforese, as bandas de ADN ou ARN podem ser visualizadas utilizando corantes fluorescentes, brometo de etídio ou outros corantes de ácidos nucleicos. Além disso, o tampão TAE é essencial em técnicas de purificação de ácidos nucleicos, como a extração em gel, onde é utilizado para solubilizar fragmentos de ADN ou ARN de géis de agarose para aplicações subsequentes a jusante. Os esforços de investigação em curso centram-se na otimização das formulações do tampão TAE para aplicações específicas e na exploração da sua compatibilidade com técnicas emergentes de análise de ácidos nucleicos, como a sequenciação de nova geração e a PCR digital.