Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
TRIM8 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-429995-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRIM8O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRIM8 (m) e o Plasmídeo Double Nickase TRIM8 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Trim8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRIM8 Anticorpo (B-3): sc-398878
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRIM8 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-429995-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRIM8 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-429995-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Trim8 codifica a TRIM8, uma ligase E3 de ubiquitina do tipo RING da família TRIM, que regula a estabilidade proteica e a sinalização por mecanismos dependentes de ubiquitina. Em células de camundongo, a TRIM8 tem sido associada à modulação de vias-chave de estresse e inflamação, incluindo respostas relacionadas ao p53, sinalização de NF-κB e os efeitos da via JAK/STAT, influenciando proliferação, apoptose e programas transcricionais induzidos por citocinas. Em função desses papéis, a TRIM8 é frequentemente estudada em contextos de integridade genômica, regulação da imunidade inata e decisões de destino celular. A atividade desregulada de TRIM8 tem sido associada a processos patológicos envolvendo sinalização inflamatória aberrante e alteração da função de redes de supressores tumorais, reforçando sua relevância em pesquisas com modelos de doença.
TRIM8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Trim8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Trim8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Trim8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Trim8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.