TOM40 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400967

개요

TOMM40은 핵에 의해 암호화된 미토콘드리아 단백질의 인식과 수입을 매개하는 미토콘드리아 외막 단백질 수송체(TOM) 복합체의 공극 형성 β-배럴 소단위인 TOM40을 암호화합니다. TOM40은 전구체 단백질의 미토콘드리아 내로의 이동을 조절함으로써 산화적 인산화, 미토콘드리아 단백질 항상성(proteostasis), 그리고 미토파지(mitophagy)를 포함한 스트레스 반응성 품질 관리 경로를 뒷받침합니다. TOMM40의 기능 또는 발현이 변화하면 미토콘드리아 생체에너지 대사가 교란되고 잘못 위치한 단백질의 축적이 촉진될 수 있으며, 이는 미토콘드리아 단백질 수입 결함을 신경퇴행성 및 대사 질환의 기전과 연결합니다. TOMM40 유전자 좌위의 유전적 변이는 노화 관련 표현형 및 신경계 질환 위험과의 관련성 측면에서 연구되어 왔으며, 이에 따라 관련 세포 모델에서의 기전적 규명이 동기부여되고 있습니다.

TOM40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TOMM40 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TOMM40 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TOMM40의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TOM40 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TOM40 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TOMM40 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TOM40 기능에 중요한 TOMM40 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TOMM40 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TOM40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TOM40 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TOMM40 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TOM40 HDR 플라스미드 (h) 및 TOM40 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TOMM40 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TOMM40 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.